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歷經4年研發，我國科學家自主研制出僅重2.6克的新一代多色微型化雙光子顯微鏡，首次實現自由活動小鼠高分辨率的深腦雙光子彩色成像，為解碼復雜腦功能機制提供了新工具。該成果21日在《自然-方法》上在線發表。

雙光子顯微成像技術是基于雙光子吸收及激發熒光的一種非線性光學成像技術，其關鍵器件之一是空心光纖。通過光纖內部微結構，將激光約束其中進行傳輸，再打在標記熒光的細胞上，從而產生熒光圖像。不同波長的激光其成像顏色不同。此前的空心光纖只能傳輸單一波長的超快激光，限制了其多色成像能力。

北京大學程和平、王愛民團隊聯合北京信息科技大學吳潤龍團隊制出一種新型超寬帶空心光纖，具有低損耗、低色散等特點，可實現波長700至1060納米的多種波長的飛秒脈沖激光傳輸，進而研制出多色微型化雙光子顯微鏡。

“這相當于給大腦彩色直播神經元與細胞器的動態活動。”吳潤龍教授說，過去受空心光纖功能限制，只能用顯微鏡看單類型細胞，現在不同類型細胞都可有不同顏色的熒光標記，就能清楚看到多種細胞間的復雜行為，研究其如何協同互作。

研究人員給患有阿爾茨海默病的小鼠頭上戴上這種顯微鏡，首次同步捕捉到神經元鈣信號、線粒體鈣信號與斑塊沉積的紅、綠、藍三色動態影像，并在疾病早期階段就觀察到鄰近斑塊的細胞和線粒體活動異常現象。

團隊還在小鼠腦超820微米深度的皮層，獲得了神經元鈣信號與結構成像——這是目前已知在不破壞腦組織情況下所獲得的最深的微型化雙光子顯微鏡成像。此外，顯微鏡鏡頭還成功實現了大視場觀測與高分辨精細成像的無縫轉換。

北京大學國家生物醫學成像科學中心主任程和平說，多年來，多色熒光標記無創深腦成像能力只能在大型臺式設備上實現，團隊首次解決了微型化雙光子顯微鏡多色激發成像的難題，為研究大腦復雜網絡帶來突破性進展。未來，該技術將在理解腦認知原理、腦疾病機制研究、神經藥物評估以及腦機接口等領域具廣泛應用前景。

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